Natrio citrato buferis naudojamas RNR izoliavimui, nes jis sumažina RNR grandinių hidrolizę. Tai daro svarbų mRNR gryninimo etapą genomo tyrimų metu arba transkripcijos tyrimui.
Citrato pagrindu esantys buferiai taip pat gali padėti nustatyti antigenus fiksuotuose audinių preparatuose, nes jie sulaužo kryžminius ryšius, susidariusius tarp antigenų ir fiksavimo terpės.
Žemiau pateiktame gideme užpilkite natrio citrato buferį, kurio pH yra 6. Instrukcijos yra ne tik lengvos, bet ir greitai atliekamos. Tai atliks tik apie 10 minučių, kad atliktumėte šiuos veiksmus.
Du variantai, kaip padaryti buferį
Yra du būdai, kaip sukurti natrio citrato buferį. Pirma, nustatykite, ar turite ir citrinos rūgštį, ir konjugato bazę, natrio citratą. Jei turite tik citrinų rūgštį, tai nėra problema. Jūs vis dar galite padaryti buferį.
Kita vertus, jei turite ir rūgštį, ir bazę, sukurkite kiekvieno iš jų esamą tirpalą. Sumaišykite 21 gramą citrinų rūgšties 1 litre distiliuoto vandens ir 29,4 gramų natrio citrato 1 litre distiliuoto vandens.
Jei turite tik citrinų rūgštį, sumaišykite 2,1 gramus beveik 1 litro distiliuoto vandens ir pereikite prie kito žingsnio.
Citrininės rūgšties ir natrio citrato tirpalų maišymas
Dabar, kai sukūrėte savo pradinį tirpalą (jei turite rūgštį ir bazę) arba sumaišote rūgštį distiliuotame vandenyje (jei to nepadarėte), galite sutelkti dėmesį į savo sprendimus.
Sumaišykite 82 ml citrinų rūgšties tirpalo su 18 mililitrų natrio citrato tirpalo.
Tada sumaišykite mišinio kiekį su distiliuotu vandeniu iki maždaug 1 litro. Palikite pakankamai tūrį, kad kitą žingsnį būtų galima pridėti natrio hidroksido (NaOH).
PH sureguliavimas
Lengvai maišant tirpalą magnetine maišykle naudokite 1M natrio hidroksidą, kad mišinio pH būtų sureguliuotas iki 6.0. Po to, naudojant tūrio matavimo kolbą, ištirpinkite galutinį tirpalo kiekį iki 1 litro distiliuotu vandeniu.
Ką reikia padaryti buferiui
Ne tik jums neužims labai daug laiko, kad gautų natrio citrato buferį, bet jums taip pat nereikės daug medžiagų. Su citrinų rūgštimi, 1 M natrio hidroksido, distiliuoto vandens ir kalibruoto pH zondo, jūs būsite pusiaukelėje. Natrio citrato naudojimas yra neprivalomas.
Į buferį taip pat reikės 1 litro graduuotojo cilindro, 1 litro tūrio matavimo kolbos ir 3 litrų talpos butelių. Galiausiai jums reikės magnetinio maišymo juostos ir magnetinės maišyklės.
Jei neturite visų šių medžiagų, apsvarstykite galimybę naudoti laboratoriją savo mokykloje arba darbo vietoje, todėl jums nereikės jų pirkti. Taip pat galite lengvai įsigyti šias medžiagas internetu arba aplankyti specializuotų prekių parduotuvę savo teritorijoje.