Šaldymo džiovinimo kultūrų pagrindai (liofilizavimas)
Liofilizacija, dar vadinama "šaldymo džiovinimu", yra procesas, naudojamas biologinei medžiagai išsaugoti pašalinant iš mėginio vandenį, kuris pirmiausia užšaldo mėginį ir po to džiovinamas vakuume labai žemoje temperatūroje. Liofilizuoti mėginiai gali būti laikomi daug ilgiau negu nevalyti mėginiai.
Kodėl liofilizacija naudojama
Bakterijų kultūrų liofilizavimas arba liofilizavimas stabilizuoja ilgalaikio saugojimo kultūras, tuo pačiu sumažinant žalą, kurią gali sukelti griežtai džiovinant mėginį.
Daugelis mikroorganizmų išgyvena gerai, kai jie yra liofilizuoti, ir jie gali būti lengvai rehidratuoti ir auginami kultūros terpėje, ilgą laiką laikant.
Liofilizacija taip pat naudojama biotechnologijų ir biomedicinos pramonėje, siekiant išsaugoti vakcinas, kraujo mėginius, išgrynintus baltymus ir kitą biologinę medžiagą.
Ši trumpa laboratorinė procedūra gali būti naudojama su bet kokiu komerciškai prieinamu šalčio džiovintuvu, kad išsaugotumėte savo kultūros kolekciją.
Liofilizacijos procesas
Liofilizacijos procesas iš tiesų yra fizinio reiškinio, pavadinto sublimacija, taikymas: cheminės medžiagos perėjimas iš kietos į dujinę būseną be pirmojo skysčio fazės. Liofilizuojant, užšaldyto bandinio vanduo pašalinamas kaip vandens garai, neatlikus bandinio pradinio atšilimo.
Daznos klaidos
Viena iš labiausiai paplitusių klaidų, kai kalbama apie liofilizaciją, nėra žinios apie mėginio lydymosi temperatūrą, todėl sunku pasirinkti tinkamą liofilizatorių.
Jūsų mėginiai gali ištirpti proceso metu. Dar viena dažniausia klaida - minkšta džiovinama šaldytuvo džiovintuve. Per pirminę džiovinimą turėtumėte nustatyti lentynos temperatūrą šiek tiek žemiau mėginio eutektinės temperatūros. Turėtų būti tik tiek šilumos, kad paskatintų mėginio molekules judėti, bet neleidžia tirpinti.
Trečioji klaida yra netinkama jūsų pavyzdžių įranga. Kadangi šaldymo džiovintuvai yra naudojami grupės nustatymuose, prieš įsigydami vieną iš šių dalykų turėtumėte žinoti:
- Kiek drėgmės bus liofilizuotas
- Ką mėginys (ir eutektinė temperatūra)
- Kaip tinkamai naudoti šaldiklį
Jei įrenginys netinkamai naudojamas, tai gali sugadinti visus mėginius. Kuris daro mums dar vieną dažną klaidą: nepakankamas vakuuminis siurblys. Siurblys turi būti puikiai tinkamas darbui, kad liofilizacija veiktų. Siurblio veikimas su dujų balastu, atidarytu 30 minučių prieš ir po šaldymo proceso, padidins siurblio veikimo trukmę. Dujų balasto atidarymas pašalina iš siurblio esančius teršalus, kad būtų išvengta vidinių komponentų pažeidimų. Dažnai reikia tikrinti siurblio alyvos spalvą ir daleles, o prireikus pakeisti alyvą. Reguliarūs alyvos pokyčiai užtikrina optimalų vakuumą siurbimo proceso metu.
Galiausiai taip pat gali būti didelė klaida netinkamai užšalimo džiovinimo reikmenims jūsų liofilizacijos procesui. Ar tau reikia vakuumo kamščio pavyzdžio? Tada reikia stabdymo kameros. Ar esate kolbose užšalusi? Tada įsitikinkite, kad turite džiovinimo kamerą su uostais.
Vengdami pirmiau nurodytų klaidų, galite geriau rūpintis savo šaldiklio džiovintuvu ir siurbliu, o geresnius mėginius galite padaryti, kai atliekamas džiovinimas.
Nuorodos
"Labconco News". "Viršutinės 5 klaidos, padarytos liofilizacijos procese". http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-mistakes